線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH輔酶Q還原酶試劑盒微量法說(shuō)明書(shū)

微量法 100管/96樣   

正式測(cè)定前務(wù)必取 2-3 個(gè)預(yù)期差異較大的樣本做預(yù)測(cè)定

商品屬性：

產(chǎn)品名稱(chēng)：線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH輔酶Q還原酶試劑盒微量法

貨號(hào)：LZ-S016

規(guī)格 : 100管/96樣

測(cè)試方法:微量法

產(chǎn)品分類(lèi)：輔酶Ⅰ系列

發(fā)貨地：上海

測(cè)定意義:

復(fù)合體Ⅰ（EC 1.6.5. 3）又稱(chēng)NADH-CoQ 還原酶或NADH脫氫酶，廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞的線粒體中，是線粒體內(nèi)膜中大的蛋白復(fù)合物。該酶催化一對(duì)電子從NADH傳遞給CoQ，同時(shí)可使O2還原生成O2.-，是呼吸電子傳遞鏈上產(chǎn)生O2.-的主要部位。測(cè)定該酶活性，不僅可以反映呼吸電子傳遞鏈（ETC）狀態(tài)，而且可以反映活性氧（ROS）生成狀態(tài)。

測(cè)定原理:

復(fù)合體Ⅰ能夠催化NADH脫氫生成NAD+，在340nm下測(cè)定NADH的氧化速率計(jì)算出該酶活性的大小。

需自備的儀器和用品：

紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

試劑的組成和配制:

試劑一：液體 100mL×1 瓶，-20℃保存；

試劑二：液體 20mL×1 瓶，-20℃保存；

試劑三：液體 1.5mL×1 瓶，-20℃保存；

試劑四：液體 25mL×1 瓶，-20℃保存；

試劑五：液體 1mL×1 支，-20℃保存；

試劑六：粉劑×1 支，-20℃保存，用時(shí)加入 2mL 蒸餾水；用不完的試劑分裝后-20℃保存，

禁止反復(fù)凍融。

臨用前將試劑五轉(zhuǎn)移到試劑四中混合溶解；用不完的試劑分裝后-20℃保

存，禁止反復(fù)凍融。

樣本的前處理：

組織、細(xì)菌或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離：

① 準(zhǔn)確稱(chēng)取 0.1g 組織或收集 500 萬(wàn)細(xì)胞，加入 1mL 試劑一和 10uL 試劑三，用冰浴勻漿器或研缽勻漿。

② 將勻漿 600g，4℃離心 5min。

③ 棄沉淀，將上清液移至另一離心管中，11000g，4℃離心 10min。

④ 上清液即為除去線粒體的胞漿蛋白，可用于測(cè)定從線粒體泄漏的復(fù)合體Ⅰ（此步可選做）。

⑤ 步驟④中的沉淀即為線粒體，加入 200uL 試劑二和 2uL 試劑三，超聲波破碎（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10 秒，重復(fù) 30 次），用于復(fù)合體Ⅰ酶活性測(cè)定。

生化檢測(cè)試劑盒操作步驟：

一、?準(zhǔn)備工具和環(huán)境?：確保操作臺(tái)面干凈、整潔，這是進(jìn)行科學(xué)實(shí)驗(yàn)的步。杭州

?二、?仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)?：這是使用試劑盒的基礎(chǔ)，說(shuō)明書(shū)包含了所有必要的信息和操作指南。

三、樣本采集?：按照說(shuō)明書(shū)的指導(dǎo)，正確采集樣本。不同類(lèi)型的檢測(cè)可能需要不同類(lèi)型的樣本，如血液、唾液或鼻涕等。

?四、樣本混合?：將樣本與試劑小心混合，注意輕柔操作，避免產(chǎn)生泡沫，以確保檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

?五、?等待反應(yīng)?：混合后，耐心等待試劑盒的反應(yīng)，這個(gè)時(shí)間可以用來(lái)進(jìn)行其他活動(dòng)，但不要著急，因?yàn)楹玫慕Y(jié)果值得等待。

六、結(jié)果判讀?：時(shí)間到后，仔細(xì)判讀結(jié)果。試劑盒通常會(huì)有明確的指示，告訴你如何根據(jù)顯示的線條或顏色來(lái)判斷結(jié)果。

公司正在出售的產(chǎn)品：

streptomycin/OVA 鏈霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白 10mgstreptomycin/OVA 鏈霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白

COL6A3 Protein Human 重組人 COL6A3 / Collagen-VI 蛋白 (His 標(biāo)簽)

ART3重組人 ART3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

TEK Protein Human 重組人 Tie2 / CD202b 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

CD200R1重組人 CD200R1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

小鼠神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白3(G3)ELISA試劑盒 ，英文名： G3 ELISA Kit

小鼠可溶性腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)ELISA檢測(cè)試劑盒Mousesolubletumornecrosisfactor-relatedapoptosisinducingligand,sAILELISAKIT 96T/48T

人肝素輔因子Ⅱ(HCⅡ)試劑盒 Human HCⅡ ELISA Kit

RatHya]uronatebindingprotein,HABPELISAKit大鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

BPE蛋白標(biāo)記試劑盒(不含BPE)3次(1毫克/次)

MouseIerleukin4,IL-4ELISA試劑盒小鼠白介素4(IL-4)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

ART3重組人 ART3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

streptomycin/OVA 鏈霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白 10mgstreptomycin/OVA 鏈霉素偶聯(lián)雞卵白蛋白

CD200R1重組人 CD200R1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

COL6A3 Protein Human 重組人 COL6A3 / Collagen-VI 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TEK Protein Human 重組人 Tie2 / CD202b 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

線粒體呼吸鏈復(fù)合體Ⅰ/NADH輔酶Q還原酶試劑盒微量法小鼠肝炎病毒(MHV)ELISA試劑盒

Human dihydrotestosterone (DHT) ELISA Kit 人雙氫(DHT)ELISA試劑盒

Humansolubleplateletendothelialcelladhesionmolecule1,sPECAM-1ELISAKit 人可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-toxoplasmaIgGaibody,ai-toxIgGELISA試劑盒人抗弓形體IgM抗體(ai-toxIgM)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物氧化應(yīng)激活性氧(ROS)比色法測(cè)定試劑盒(單線態(tài)氧氣)20次

Humanansferrieceptor，TFRELISAKit人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

注意事項(xiàng):

①加入試劑的順序應(yīng)一致,以所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。

②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

③按照說(shuō)明書(shū)中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。

④底物A應(yīng)揮發(fā),避免長(zhǎng)時(shí)間打開(kāi)蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長(zhǎng)時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。

⑤洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。

⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器 。

⑦實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。

⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。

⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。