ASM酸性神經鞘磷脂酶ELISA試劑盒
試劑盒性能:
1. 特異性高:由于是抗原抗體的特異性結合,因此試驗的特異性很高,能夠排除其他物質的干擾。
2. 靈敏度高:ASM 試劑盒由于酶的放大作用,使得試驗的靈敏度大大提高,能夠檢測出微量的抗原或抗體。
3. 操作簡便:ELISA試驗操作相對簡單,容易掌握,適合于大規模樣本檢測。
4. 適用范圍廣:可以用于檢測各種抗原、抗體和激素等生物分子。
操作步驟:
ELISA試劑盒怎么選擇?
01 靈敏度
脂酶試劑盒靈敏度—試劑盒對于被檢物質的低檢測能力,如果我們待檢物質濃度量很低,可以選擇高靈敏的試劑盒。靈敏度取值為空白對照的標準差對應的濃度值的3倍。
02 特異性
上海特異性—判斷其他分子與試劑盒抗體的結合能力。交叉反應越小,試劑盒的特異性越好。一般需要衡量試劑盒與當前種屬同家族蛋白和其它種屬該蛋白、血清中常見因子(如異嗜性抗體、類性因子等)、靶蛋白互作蛋白無交叉反應。
03 精密性
脂酶ELISA精密性—也叫重復性,是對同一樣品重復測定時誤差大小的評估參數。一般要求板間及板內精密性控制在10%以內。菲恩生物使用全機器生產,排除人工的不穩定性,依靠電子移液槍和自動包板機加樣,嚴格控制批內差批間差。
04 準確度
酶聯ELISA試劑盒準確度—一般通過加標(spike-in)回收率來衡量,回收率在80%-120%之間為合格。通過添加標準品到天然樣本基質內進行測定,以不添加標準品的天然樣本基質為空白對照,回收率數值為靶標的測定濃度與添加的標準品濃度比值,以百分比計。回收率偏高或偏低會產生假陽性或假陰性結果,影響測定值的準確性。
05 線性
線性 —在天然樣本基質中添加有適當濃度的標準品,分別稀釋2倍、4倍、8倍來檢測,測定各濃度下的回收率,回收率在80%-120%之間為合格。
06 穩定性
穩定性—一般以加速破壞性實驗進行驗證,將未拆封的試劑盒在37°C和2-8°C分別放置一定時間,ELISA檢測試劑盒考察各項性能指標的偏差,以偏差小于10%為合格。穩定性越好,試劑盒存儲時間越長。
ELISA的基本原理有三條:(1)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其學活性; (2)抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物,而此種酶結合物仍能保持其學和酶學活性;(3)酶結合物與相應抗原或抗體結合后,可根據加入底物的顏色反應來判定是否有反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。由于ELISA法一方面是建立在抗原與抗體學反應的基礎上,因而,具有特異性。而另一方面又由于酶標記抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結合物,它可以催化底物分子發生反應,產生放大作用,正因為此種放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此,ELISA法是一種既敏感又特異的方法。
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