兔角質形成細胞
基本屬性:
細胞名稱:兔角質形成細胞
組織來源:皮膚
商品貨號:LZ-YX10427
種屬來源:兔
產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶
細胞簡介:
角質形成細胞是一種不斷分化的復層鱗狀上皮細胞,其分化的終階是形成角蛋白。根據角質形成細胞的發展階段和特點,從內向外可將其分為五層。基底細胞層又稱層,棘細胞層,顆粒層,透明層,角質層。角質形成細胞的分化成熟表現為從基底層到向角質層的逐漸移行。在單一移行過程中,角質形成;細胞的形狀和功能也逐漸發生著變化,從單層柱狀上皮的基底層到扁平的細胞核消失的角質層。新生的基底細胞進入棘細胞層,然后上移到顆粒層的上層。
培養基:原代角質形成細胞培養體系
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:上皮細胞樣
傳代特性:根據細胞特性
消化液:0.25%胰蛋白酶
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
使用方法:
兔角質形成細胞是一種貼壁細胞,細胞形態呈上皮細胞樣,在技術部標準操作流程下,根據細胞特性,建議您收到細胞后盡快進行相關實驗。
客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作。
1. 取出T25細胞培養瓶,用75%消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置3-4h,以穩定細胞狀態。
兔角質形成細胞規格2. 貼壁細胞消化
1)吸出T25細胞培養瓶中的培養基,用PBS清洗細胞一次;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養瓶中,輕微轉動培養瓶至消化液覆蓋整個培養瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養基終止消化;
3)用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養箱中靜置培養;
4)待細胞完全貼壁后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基。
3. 細胞收貨脫落
1)收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀;
2)添加0.25%胰蛋白酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min);消化完向離心管內加入5ml完全培養基終止消化;
3)經1000rpm,離心5min,丟棄上清,用5ml完全培養基(補加1%FBS,促進貼壁)重懸沉淀,接種于新的培養瓶內;
兔角質形成細胞品牌4)待細胞完全貼壁后,培養觀察;之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養基(37℃預熱)。
原代細胞試用的實驗類型:
上海前面我們了解了原代細胞獲取和培養過程中應該注意的一些細節,這有助于我們培養我們的原代細胞。那么原代細胞培養好后,它可適用哪些研究呢?
原代細胞不僅廣泛應用于分子、細胞生物學和生物醫學基礎研究,如蛋白質組學、基因組學、細胞株(系)研究、DNA,RNA和遺傳學研究等,還可應用于當今熱門的生物醫藥產業如藥物篩選、藥物代謝和毒理研究、癌癥藥物的研究等。在這些應用中幾乎都涉及了幾個常見的且基礎的細胞實驗,如下:
一、細胞增殖檢測:
常見檢測方法:CCK8檢測法 ,MTT檢測法,Brdu檢測法,Edu檢測法,平板克隆形成
二、細胞周期檢測
常見檢測方法:流式檢測細胞周期,標記有絲分裂百分率法
三、細胞凋亡檢測
常見檢測方法:流式檢測細胞凋亡,線粒體膜電位,活性氧檢測,Hoechst染色,電鏡,TUNEL
四、細胞轉移能力檢測
常見檢測方法:細胞劃痕實驗,Transwell實驗,Invasion實驗
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